ATCC原代細胞的制備流程主要包括組織塊培養法和分離細胞培養法。以下是這兩種方法的具體步驟：
1.組織塊培養法
準備組織材料：將取得的組織材料用培養液濕潤，并使用鋒利的眼科剪去除脂肪和結締組織，然后用平衡液（PBS或Hanks液）漂洗多次，直至液體清亮。
剪切組織塊：使用眼科彎剪將組織塊剪成小塊，并用PBS或Hanks液再次漂洗。
放置組織塊：用吸管吸取切碎的組織塊，輕輕吹到培養瓶皿中，均勻分布，注意不要使組織塊與培養液接觸。
培養組織塊：將培養瓶翻轉，使瓶底朝上，在種植了組織塊一側的對側面加足培養液，塞緊瓶塞后靜置于37℃培養箱中。
更換培養液：每隔2到3天更換一次培養液，或者根據培養瓶種顏色的變化確定換液時間。
2.分離細胞培養法
消化組織：首先用細胞分散法收獲細胞，隨時吸取少量消化液在鏡下觀察，并根據組織是否分散成細胞團或單個細胞，采取終止消化措施。
制備細胞懸液：低速離心細胞懸液，棄掉上清液，加入含血清的培養液，輕輕吹打制成細胞懸液，計數并用培養液調整細胞密度。
接種細胞：根據培養的細胞類型和實驗要求，用吸管吸取一定量的細胞懸液，加到培養瓶中，對于需要特殊底物的細胞，要先將底物涂一層于培養瓶皿底壁，然后接種細胞。
培養細胞：將培養瓶放入37℃恒溫箱中培養，每隔2到3天更換培養液一次或根據培養液顏色的變化確定換液時間。
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