原代細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用和分離時(shí)需要注意的方面

　　原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用：

　　1、為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；

　　2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；

　　3、服務(wù)于臨床實(shí)踐，用于藥物篩選等。

　　原代細(xì)胞培養(yǎng)之后分離需要注意的地方：

　　1、原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí)，它們之間會互相影響，在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)，使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長。如果接種的細(xì)胞密度過低，細(xì)胞之間的促生長作用很小，也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過程。如果接種的細(xì)胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足，代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。

　　2、適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度，給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用，會極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。

　　3、盡快使接種的細(xì)胞貼壁，是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵?？梢栽诮臃N后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h，待細(xì)胞貼壁后，再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。