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    染料法熒光定量PCR試劑盒的安全操作注意

    更新時間:2021-06-11 點擊量:1331
       染料法熒光定量PCR試劑盒中聚合酶鏈式反應是體外酶促合成特異DNA片段的一種經典方法,由變性、退火及適溫延伸組成,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,是分子生物學實驗的基本實驗技術。
      熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種:探針法熒光定量PCR試劑盒和染料法熒光定量PCR試劑盒。而熒光定量PCR的方法相應的可分為特異類和非特異類兩類,特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物;而非特異性檢測方法是在在PCR反應體系中,加入過量熒光染料,熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射出熒光信號。前者由于增加了探針的識別步驟,特異性更高,但后者則簡便易行。
      染料法熒光定量PCR試劑盒注意事項:
      1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
      2. 試劑若低溫保存,易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在溫水水浴中預熱十分鐘,以溶解沉淀,混勻后再使用。
      3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的。否則,電泳時會在泳道中出現一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。
      4. 建議擴增片段長度1kb以內,以便擴增效率佳。
      5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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