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如何避免胎牛血清中產生沉淀?

更新時間:2022-03-27 點擊量:4928
  胎牛血清作用主要體現在哪些方面:
  1、提供維持細胞指數生長的激素、基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
  2、起酸堿度緩沖液作用。
  3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
  4、提供結合蛋白,能識別并結合維生素、脂類、金屬和其他激素等,能調節它們所結合物質的活力。
  5、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
  6、提供蛋白酶抑制劑,細胞傳代時能使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
  如何避免胎牛血清中產生沉淀?
  解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
  胎牛血清作凍融方法和注意事項:
  將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小時左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
  切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水,因為在水浴中血清迅速熔化,很大的溫差(-20℃到37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清產生沉淀。
  血清應該在-10℃以下保存。若一次無法用完一瓶,應該無菌分裝,再冷凍保存。
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